题目：通过新型“中药-体内化合物-靶点-通路”网络方法对复杂中药制剂进行品质和成分控制:以莲花清瘟胶囊为例

英文名：Quality and Composition Control of Complex TCM Preparations Through a Novel “Herbs-in-vivo Compounds-Targets-Pathways” Network Methodology: The Case of Lianhuaqingwen Capsules

杂志：Pharmacological Research

影响因子：9.1

发表时间：2025年2月12日

研究背景：莲花清瘟（LHQW）胶囊是一种包含13种草药成分的中成药，广泛应用于呼吸系统疾病的治疗。然而，LHQW的复杂成分使得其质量和一致性评估变得困难。本研究旨在通过中医整体观念，结合体内外的DRUG-seq、RNA-seq和药效验证数据，强调体内暴露的观点，系统筛选LHQW中高体内暴露且具有显著活性潜力的化合物，以建立稳健的质量控制标志物。

研究思路：本研究首先利用DRUG-seq技术评估LHQW成分中的已知质量控制化合物及其代谢物对基因表达的影响，以指导药效学研究。其次，通过UPLC-HRMS和自主开发的数据处理平台，全面定性评价大鼠体内的LHQW组分，阐明多种成分的ADME谱。随后，采用高效液相色谱串联质谱（HPLC-MS/MS）方法，对大鼠血浆中的多种LHQW成分进行同时定量，研究其在生物系统内的动态变化。此外，利用药代动力学参数筛选出以高体内暴露为特征的潜在活性成分。例如，通过曲线下面积（AUC）、最大浓度（Cmax）、达到最大浓度的时间（Tmax）和半衰期（t1/2）等参数进行评估。后续采用病理切片、免疫荧光和RNA-seq技术探讨活性成分的药理作用及其机制，利用RT-qPCR对LPS刺激的小鼠巨噬细胞进行验证，进一步通过ELISA评估候选药物的抗炎特性。最终，选取具备高体内暴露和抗炎活性的化合物作为LHQW的潜在质量控制标志物，为提升LHQW的质量控制标准提供了参考。

研究结果：本研究利用DRUG-seq技术评估了LHQW中16种主要化合物对正常个体PBMC基因表达的影响。实验结果显示，所有DRUG-seq组可以分为两个簇，簇0与对照组高度重叠，且特征基因分析揭示了显著的基因差异，表明这些化合物对PBMCs中的基因表达具有显著影响。治疗后，两个关键基因的表达显著降低，支持LHQW胶囊的抗炎作用。GO通路分析显示LHQW通过多条通路对免疫应答产生显著抑制。此外，结合免疫浸润和相关性分析，发现某些化合物可能促进PBMC中单核细胞向树突状细胞和M2巨噬细胞的转化。通过高通量技术和代谢谱分析，发现单次施用LHQW后，大鼠吸收219种重要化合物，合并氧化、去甲基化、硫酸化等代谢过程为其药效提供了潜在支持。

总结：本研究通过建立“中药-体内化合物-靶点-通路”网络，整合DRUG-seq、RNA-seq和药代动力学技术，筛选出莲花清瘟胶囊中15个高暴露且具有显著活性的潜在质量控制标志物，并在细胞及动物模型中验证了其抗炎效果，为优化莲花清瘟胶囊的质量控制标准提供了科学依据。针对生信分析的深耕，AG百家乐致力于提供丰富的实验方案及机制研究服务，助力您的科研和职业发展。